簡要描述:石蠟樣本番紅固綠染色實驗服務(wù)是伊萊博生物的基礎(chǔ)服務(wù)項目之一,由專業(yè)的實驗技術(shù)人員操作完成。
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?脫蠟至水?
依次浸泡:二甲苯Ⅰ 20min → 二甲苯Ⅱ 20min → 無水乙醇Ⅰ 5-10min → 無水乙醇Ⅱ 5-10min → 梯度酒精(95%→70%)各5min → 蒸餾水沖洗
。
?番紅染色?
浸入1%番紅染液1-2小時(軟骨染色),自來水沖洗去除多余染料
。
部分方案需梯度酒精(50%-80%)脫色各1分鐘
。
?固綠染色?
0.5%固綠染液浸染30-60秒(骨組織染色),無水乙醇快速脫色30秒
。
弱酸溶液(如冰醋酸)分化10-15秒以去除殘留染料
。
?脫水與封片?
快速脫水:95%乙醇→無水乙醇各15秒 → 二甲苯透明5分鐘 → 中性樹膠封片
。
?染色順序?:番紅(堿性)先染軟骨,固綠(酸性)后染骨組織,避免交叉干擾
。
?分化控制?:固綠染色后需快速分化,防止過度脫色導(dǎo)致信號減弱
。
?結(jié)果判讀?:
?陽性信號?:軟骨呈紅色,骨組織或木質(zhì)化細(xì)胞壁呈綠色
。
?背景?:應(yīng)為無色或淺色,否則需調(diào)整分化時間
。
?脫蠟?:延長二甲苯浸泡時間至30分鐘
。
?染色不均?:確保染液新鮮,切片浸入液體中
。
如需植物樣本染色(如楊梅花),需調(diào)整固定和脫水時間
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